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Come si carica un campione nella cromatografia su colonna?
Come si carica un campione nella cromatografia su colonna?

Video: Come si carica un campione nella cromatografia su colonna?

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Video: cromatografia su colonna classica 2024, Dicembre
Anonim

Per caricare la colonna:

  1. Sciogliere il campione nella quantità minima di solvente (5-10 gocce).
  2. Usando una pipetta o una siringa con un ago spesso, gocciolare il campione direttamente sulla parte superiore della silice.
  3. Una volta che l'intero campione è stato aggiunto, consentire il colonna drenare in modo che il livello del solvente tocchi la parte superiore della silice.

A questo proposito, quanta silice usi in una colonna?

Un buon intervallo va da 100/20 a 100/10 (da 5 a 10 ml) di eluente per 100 g silice . Non è una buona idea utilizzo un solvente diverso qui - la separazione sarà gravemente compromessa.

In secondo luogo, come funziona la cromatografia flash su colonna? Cromatografia flash . Strato sottile cromatografia viene utilizzato per monitorare le reazioni, verificare la purezza dei composti e ottimizzare le miscele di solventi per cromatografia su colonna . È una micro-tecnica che richiede quantità molto piccole di composto.

Pertanto, perché è importante non lasciare che la fase stazionaria si asciughi durante l'esecuzione di una colonna?

In altre parole, il liquame all'interno del colonna non dovrebbe mai essere permesso asciugare . Se ciò accade può creare crepe e irregolarità nel solido fase , che diminuirà l'efficienza della separazione. Il campione da separare viene caricato in soluzione in un opportuno solvente, preferibilmente il più concentrato possibile.

Cosa succede se la colonna funziona a secco?

Se lasci che colonna a secco la silice inizierà a rompersi e otterrai una scarsa separazione dei tuoi composti. Come te correre il colonna , non lasciare mai che il livello del solvente scenda al di sotto del livello del gel di silice o otterrai risultati scadenti.

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