Perché lo spettrofotometro deve essere impostato su una particolare lunghezza d'onda?
Perché lo spettrofotometro deve essere impostato su una particolare lunghezza d'onda?

Video: Perché lo spettrofotometro deve essere impostato su una particolare lunghezza d'onda?

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Video: Fosfati tramite spettrofotometro UV-vis (retta di taratura) - Corso di chimica analitica 2024, Maggio
Anonim

Quando si regola il lunghezza d'onda su un spettrofotometro , tu sono cambiando la posizione del prisma o del reticolo di diffrazione in modo che diverso lunghezze d'onda di luce sono diretto alla fessura. Minore è la larghezza della fessura, migliore è la capacità dello strumento di risolvere vari composti.

Di conseguenza, a quale lunghezza d'onda sarà impostato lo spettrofotometro?

A seconda dell'intervallo di lunghezze d'onda della sorgente luminosa, può essere classificato in due diversi tipi: Spettrofotometro UV-visibile: utilizza la luce nell'intervallo dell'ultravioletto (185 - 400 nm) e nell'intervallo visibile (400 - 700 nm ) dello spettro delle radiazioni elettromagnetiche.

Allo stesso modo, perché è necessario calibrare lo spettrometro ogni volta che si cambia la lunghezza d'onda? Spettrofotometro deve essere calibrato contro una soluzione vuota quindi Quello misurazioni successive possono utilizzare l'assorbanza della soluzione del bianco come riferimento zero. Una misura della capacità di una sostanza di assorbire la luce di un determinato lunghezza d'onda.

a quale lunghezza d'onda dovrebbero essere prese le letture?

Prendere letture a intervalli di 5 nm un po' prima e dopo questo lunghezza d'onda . Ad esempio, se l'assorbanza massima è stata trovata a 450 nm, per ottenere un'assorbanza più accurata lettura di max, prendi l'assorbanza letture a 440, 445, 455 e 460 nm.

Perché stai misurando l'assorbanza della soluzione a 550 nm?

Le proteine reagiscono con gli ioni di rame in ambiente alcalino soluzione per formare un complesso di colore viola che assorbe la luce a 550 nm . Pertanto, da misurare la concentrazione del complesso, utilizzando A550 ( Assorbanza a 550 nm ), tu sono anche misurare la concentrazione di proteine.

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