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Come si trova la concentrazione di DNA dall'assorbanza?
Come si trova la concentrazione di DNA dall'assorbanza?

Video: Come si trova la concentrazione di DNA dall'assorbanza?

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Video: Tecniche di biologia molecolare 1: Assorbanza, effetto ipercromico, Denaturazione del DNA 2024, Novembre
Anonim

concentrazione del DNA è stimato misurando il assorbanza a 260nm, regolando l'A260 misura della torbidità (misurata da assorbanza a 320 nm), moltiplicando per il fattore di diluizione e utilizzando la relazione che un A260 di 1,0 = 50µg/ml dsDNA puro.

Allo stesso modo, le persone chiedono, come trovi la concentrazione del DNA?

Per determinare la concentrazione di DNA nel campione originale, eseguire il seguente calcolo:

  1. concentrazione dsDNA = 50 μg/mL × OD260 × fattore di diluizione.
  2. concentrazione di dsDNA = 50 μg/mL × 0,65 × 50.
  3. concentrazione di dsDNA = 1,63 mg/mL.

Inoltre, qual è una buona concentrazione di DNA? UN Buona qualità DNA il campione dovrebbe avere A260/UN280 rapporto di 1,7-2,0 e un A260/UN230 rapporto superiore a 1,5, ma poiché la sensibilità delle diverse tecniche a questi contaminanti varia, questi valori devono essere presi solo come guida per la purezza del campione.

In questo modo il DNA assorbe a 280 nm?

Il rapporto di assorbanza a 260 nm vs 280 nm è comunemente usato per valutare DNA contaminazione di soluzioni proteiche, poiché le proteine (in particolare gli amminoacidi aromatici) assorbire luce a 280 nm.

Come si usa NanoDrop per la concentrazione del DNA?

Fondamentalmente il nanogoccia ti dà la possibilità di selezionare DNA , RNA, proteine. Devi selezionare DNA , quindi posizionare 2 L d'acqua (mili Q preferent) selezionare "Blank" dopodiché aggiungere altri 2 L d'acqua per confermare che la misura è 0. Quindi posizionare 2 ΜL del campione. Otterrai la misura.

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